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N°
Año
Cita
Método
Resumen
Disponible en
08 2011 Mattiucci S, Paoletti M, Borrini F, Palumbo M,
Macarone R, Gomes V, Casati A, Nascetti G. 2011.
First molecular identification of the zoonotic pa-
rasite
Anisakis pegreffii
(Nematoda: Anisakidae)
in a paraffin-embedded granuloma taken from a
case of human intestinal anisakiasis in Italy. BMC
Infect Dis. 11: 82.
PCR
Se desarrolló un método de PCR que amplifica el ADN de
Anisakis
spp. en tejido fijado en
parafina. Este método se aplicó a un granuloma eliminado de un caso humano de anisakiasis
intestinal en Italia. Se usaron cebadores específicos del gen mtDNA cox2 y se realizó el análisis
de la secuencia de acuerdo con el procedimiento ya establecido para las especies de
Anisakis
.
El caso de la anisakiasis humana presentada refuerza el significado patológico de la especie
A. pegreffii
a los humanos. El enfoque metodológico molecular/genético basado en el análisis
de secuencia de mtDNA cox2, descrito aquí, puede permitir la identificación fácil y rápida de
Anisakis
spp. en fijaciones con formol y tejidos incrustados en parafina, extraídos de casos de
anisakiasis humana gástrica o intestinal.
3/
09 2011 Herrero B, Vieites JM, Espiñeira M. 2011.
Detection of anisakids in fish and seafood
products by real-time PCR. Food Control. 22(6):
933-939.
PCR en tiempo real
Un ensayo en tiempo real de la sonda TaqMan®LNA dirigidas al citocromo oxidasa subunidad
I (COI) fue desarrollado permitiendo la detección simultánea de las especies de anisákidos
más importantes presentes en pescados y mariscos. La determinación del límite de detección
en términos de ppm fue de 1 ppm. La metodología propuesta es rápida, robusta, altamente
sensible y fácilmente adaptable en laboratorios de diagnóstico molecular rutinarios, y puede
emplearse como método de detección molecular para evaluar la seguridad alimentaria.
10 2010 Fang W, Xu S, Zhang S, Wang Y, Chen X, Luo D.
2010. PMultiple primer PCR for the identification
of anisakid nematodes from Taiwan Strait.
Experimental Parasitology. 124 (2): 197-201.
PCR múltiple
Se empleó un método de PCR y PCR múltiple, usando cebadores específicos basados en
secuencias alineadas del espaciador transcrito interno ITS-1, 5.8S e ITS-2 del ADN ribosómico
nuclear, encontrándose 6 especies larvales de anisákidos en peces marinos comerciales
capturados en la zona de pesca de Minnan en el estrecho de Taiwán:
Anisakis physeteris
,
A. pegreffii
,
Raphidascaris trichiuri
,
Contracaecum aduncum
,
C. muraenesoxi
,
Contracaecum
sp. Los cebadores produjeron productos de PCR distintos para cada uno de los nematodos
anisákidos.
11 2010 Espiñeira M, Herrero B, Vieites JM, Santaclara FJ.
2010. Detection and identification of anisakids in
seafood by fragment length polymorphism analy-
sis and PCR–RFLP of ITS-1 region. Food Control.
21(7): 1051-1060.
PCR
Se desarrolló un método rápido y sensible para la detección de anisákidos en mariscos,
basado en PCR. El marcador molecular estudiado ha sido el espaciador interno transcrito 1.
La estrategia analítica consiste en dos pasos. El primer paso se basa en cebadores específicos
y el polimorfismo de longitud de la PCR amplificada. Esta primera sonda permite detectar
la presencia de anisákidos en peces y, en algunos casos, determinar las especies. Cuando el
primer paso no es concluyente en cuanto a las especies exactas de anisakidos presentes en la
muestra, se lleva a cabo el análisis de polimorfismo de la longitud del fragmento de restricción,
lo que permitió asignar el perfil resultante a diferentes especies de anisákidos.
Tabla 10. (Continuación)